| ผู้เขียน : |
|
วันที่เขียน : 05/04/2008
วันที่ปรับปรุง : 00/00/0000
อ่าน 639 เขียน 0
|
|
| กรมประมงโดยศูนย์วิจัยและพัฒนาการเพาะเลี้ยงกุ้งทะเลฝั่งอ่าวไทย ประสบความสำเร็จในการเพาะเลี้ยงเซลล์ปฐมภูมิ ( primary cell culture ) จากลิมฟอยด์ ออร์แกน ( lymphoid organ ) ของกุ้งกุลาดำในห้องปฎิบัติการ โดยการตัดเนื้อเยื่อให้เป็นชิ้นเล็ก ๆ นำไปเลี้ยงในอาหาร 2X Liebovitz 15 ผสมรวมกับ 15% fetal calf serum, 10% shrimp meat extract และเกลือชนิดต่างๆ โดยปรับให้มีค่า osmolarity เป็น 720 + 20 mmol/kg บ่มเลี้ยงเซลล์กุ้งกุลาดำที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียส จนกระทั่งได้ปริมาณเซลล์ประมาณ 70-80% เจริญบนผิวหน้าภาชนะที่ใช้เลี้ยง |
|
โครงการวิจัย การศึกษาเชื่อไวรัสหัวเหลืองโดยการใช้เซลล์ปฐมภูมิที่ผลิตจากกุ้งกุลาดำ
ชื่อผู้ดำเนินงาน
จิราพร เกษรจันทร์ เรวัตร คงประดิษฐ์ และ สราวุธ ศรีวัฒนวรัญญู
หน่วยงาน
สถาบันวิจัยและพัฒนาการเพาะเลี้ยงกุ้งทะเล
เอกสารวิชาการ่ ฉบับที่ 6 / 2543
ทะเบียนวิจัยเลขที่ 43 43 1 30 03 02 2 186 008
บทคัดย่อ
กรมประมงโดยศูนย์วิจัยและพัฒนาการเพาะเลี้ยงกุ้งทะเลฝั่งอ่าวไทย ประสบความสำเร็จในการเพาะเลี้ยงเซลล์ปฐมภูมิ ( primary cell culture ) จากลิมฟอยด์ ออร์แกน ( lymphoid organ ) ของกุ้งกุลาดำในห้องปฎิบัติการ โดยการตัดเนื้อเยื่อให้เป็นชิ้นเล็ก ๆ นำไปเลี้ยงในอาหาร 2X Liebovitz 15 ผสมรวมกับ 15% fetal calf serum, 10% shrimp meat extract และเกลือชนิดต่างๆ โดยปรับให้มีค่า osmolarity เป็น 720 + 20 mmol/kg บ่มเลี้ยงเซลล์กุ้งกุลาดำที่อุณหภูมิ 28 องศาเซลเซียส จนกระทั่งได้ปริมาณเซลล์ประมาณ 70-80% เจริญบนผิวหน้าภาชนะที่ใช้เลี้ยง ถึงแม้ว่าคณะผู้วิจัยจะไม่ประสบความสำเร็จ ในการปลูกถ่ายเซลล์ปฐมภูมิ ของกุ้งกุลาดำในห้องปฏิบัติการ อย่างไรก็ตามเซลล์ดังกล่าวได้แยกเชื้อไวรัสบางชนิดจากกุ้งกุลาดำที่เป็นโรคได้ ในการวิจัยครั้งนี้ มุ่งเน้นถึงการใช้ประโยชน์ของเซลล์ปฐมภูมิที่เตรียมได้ในการศึกษาเชื้อไวรัสหัวเหลือง ลักษณะของเซลล์ปฐมภูมิที่ถูกไวรัสหัวเหลืองเข้าทำลายจะมีการเปลี่ยนแปลงดังนี้คือ เซลล์จะเริ่มหดตัวเป็นรูปทรงกลม (ronding ) รวมตัวเป็นกระจุก ( aggregation ) เซลล์จะค่อยๆหลุดลอกจากภาชนะ (detachment ) และตาย (lysis) ในที่สุด คณะผู้วิจัยทดลองใช้เซลล์กุ้งปฐมภูมิในการวิเคราะห์หาจำนวน (Quantitative analysis ) อนุภาคไวรัสที่เก็บรักษาไว้ในสภาพแช่เยือกแข็ง ปรากฎว่าไวรัสหัวเหลืองดังกล่าวมีค่าไตเตอร์เท่ากับ 10 7.5 TCID 50/ml สำหรับการศึกษาการยอมรับเชื้อไวรัสหัวเหลืองในอวัยวะต่างๆของกุ้งกุลาดำที่เป็นโรคนั้น พบเชื้อไวรัสหัวเหลืองมากที่สุดที่ลิมฟอยด์ออร์แกนและเหงือก มีค่าไตเตอร์เป็น 10 7.5 TCID 50/ml ในขณะที่ขาว่ายน้ำและก้านตาพบเชื้อไวรัสน้อยที่สุดมีค่าไตเตอร์เป็น 10 4.0 TCID 50/ml นอกจากนั้นยังใช้เซลล์ปฐมภูมิกุ้งในการเปรียบเทียบความรุนแรงของเชื้อไวรัสหัวเหลืองในกุ้งทะเลอีกหลายชนิด |
|