|
|
| ผู้เขียน : |
|
วันที่เขียน : 06/04/2008
วันที่ปรับปรุง : 00/00/0000
อ่าน 780 เขียน 0
|
|
| ศึกษาความเป็นไปได้ของการถ่ายทอดเชื้อตัวแดงดวงขาว (SEMBV) จากพ่อแม่พันธ์กุ้งกุลาดำสู่ลูกกุ้ง โดยตรวจสอบเชื้อตัวอย่างจากพ่อแม่กุ้งและลูกกุ้งระยะต่างๆ ที่ได้จากการเพาะฟักด้วยวิธีพีซีอาร์ , in situ hybridization และกล้องจุลทรรศน์อิเลคตรอน แบ่งพ่อแม่กุ้งที่ผ่านการตรวจเชื้อไวรัส SEMBV ออกเป็น 5 กลุ่มโดยแต่ละกลุ่มจะกินปูที่ติดเชื้อไวรัสวันละ 1 มื้อ ติดต่อกัน 2, 3, 4, และ 5 วันตามลำดับ กลุ่มควบคุมให้กินปูที่ไม่มีเชื้อไวรัส ตรวจสอบการติดเชื้อไวรัส SEMBV ในแม่กุ้งก่อนวางไข่ 1 วัน ด้วยวิธีพีซีอาร์แบบ one-step และ two-step PCR ผลปรากฏว่าแม่กุ้งที่กินเนื้อปู 2 วัน ให้ผลบวกเมื่อตรวจสอบด้วยวิธี two- step PCR ในขณะที่แม่กุ้งที่กินเนื้อปูติดต่อกัน 3, 4 และ 5 วันให้ผลบวกเมื่อตรวจสอบด้วยวิธี one- step PCR |
|
โครงการวิจัย ศึกษาความเป็นไปได้ในการถ่ายทอดเชื้อไวรัสตัวแดงดวงขาวจากพ่อแม่กุ้งกุลาดำสู่ลูกกุ้ง
ชื่อผู้ดำเนินงาน
จิราพร เกษรจันทร์ เรวัตร คงประดิษฐ์ สุดา ตัณฑวณิช และสราวุธ ศรีวัฒนวรัญญู
หน่วยงาน
สถาบันวิจัยและพัฒนาการเพาะเลี้ยงกุ้งทะเล
เอกสารวิชาการ่ ฉบับที่ 5/2543
ทะเบียนวิจัยเลขที่ 41 156 0521 0122 5005
บทคัดย่อ
ศึกษาความเป็นไปได้ของการถ่ายทอดเชื้อตัวแดงดวงขาว (SEMBV) จากพ่อแม่พันธ์กุ้งกุลาดำสู่ลูกกุ้ง โดยตรวจสอบเชื้อตัวอย่างจากพ่อแม่กุ้งและลูกกุ้งระยะต่างๆ ที่ได้จากการเพาะฟักด้วยวิธีพีซีอาร์ , in situ hybridization และกล้องจุลทรรศน์อิเลคตรอน แบ่งพ่อแม่กุ้งที่ผ่านการตรวจเชื้อไวรัส SEMBV ออกเป็น 5 กลุ่มโดยแต่ละกลุ่มจะกินปูที่ติดเชื้อไวรัสวันละ 1 มื้อ ติดต่อกัน 2, 3, 4, และ 5 วันตามลำดับ กลุ่มควบคุมให้กินปูที่ไม่มีเชื้อไวรัส ตรวจสอบการติดเชื้อไวรัส SEMBV ในแม่กุ้งก่อนวางไข่ 1 วัน ด้วยวิธีพีซีอาร์แบบ one-step และ two-step PCR ผลปรากฏว่าแม่กุ้งที่กินเนื้อปู 2 วัน ให้ผลบวกเมื่อตรวจสอบด้วยวิธี two- step PCR ในขณะที่แม่กุ้งที่กินเนื้อปูติดต่อกัน 3, 4 และ 5 วันให้ผลบวกเมื่อตรวจสอบด้วยวิธี one- step PCR ยืนยันผลการติดเชื้อไวรัส SEMBV ในแม่กุ้งด้วยกล้องจุลทรรศน์อิเลคตรอนและวิธี in situ hybridization พบเชื้อไวรัส SEMBV ในเซลล์เนื้อเยื่อเกี่ยวพัน (connective tissues) follicle cell เซลล์ไข่อ่อน (perinucleolus oocytes) และไข่ที่กำลังพัฒนา (yolky oocytes) ล้างไข่กุ้งที่ได้ในน้ำทะเลที่ผ่านการฆ่าเชื้อด้วยคลอรีนประมาณ 3-4 ครั้ง แล้วจึงย้ายไปลงถังฟัก อนุบาลลูกกุ้งต่อไปจนได้ลูกกุ้งระยะโพสลาวา ในระหว่างอนุบาลเก็บตัวอย่างลูกกุ้งระยะต่างๆ คือ nauplius zoea mysis และ post larva-15 เพื่อตรวจหาเชื้อไวรัส SEMBV ด้วยวิธีพีซีอาร์ และวิธี in situ hybridization ปรากฏว่าลูกกุ้งระยะ nauplius และ zoea ที่ได้จากพ่อแม่กุ้งที่ติดเชื้อไวรัส SEMBV เพียงเล็กน้อย (two- step PCR positive) ให้ผลเป็นบวกกับวิธี two-step PCR สำหรับลูกกุ้งกลุ่มที่เหลือทั้งหมดให้ผลบวกกับวิธี one- step PCR ส่วนแม่กุ้งที่กินเนื้อปูติดต่อกัน 4 วัน ไข่กุ้งจะไม่ฟักเป็นนอเพลียส ขณะที่แม่กุ้งกินเนื้อปูติดต่อกัน 5 วัน ไข่กุ้งจะฝ่อ เนื่องจากไข่กุ้งดังกล่าวไม่สามารถพัฒนาต่อไปเป็นไข่ที่สมบูรณ์ได้ สำหรับกรตรวจด้วยวิธี in situ hybridization พบเชื้อไวรัส SEMBV ในลูกกุ้งระยะ mysis และ post larva จากผลการทดลองแสดงให้เห็นว่า มีความเป็นไปได้ที่เชื้อไวรัส SEMBV สามารถถ่ายทอดจากพ่อแม่พันธ์กุ้งสู่ลูกกุ้งกุลาดำ (vertical transmission) โดยเชื้อไวรัสจะเกาะติดที่ผิวไข่ สำหรับไข่อ่อนและไข่ที่กำลังพัฒนาเชื้อไวรัสจะเข้าสู่นิวเคลียสและเพิ่มจำนวนอนุภาค ทำให้ไข่กุ้งไม่สามารถพัฒนาต่อไปได้ เฉพาะไข่ที่พัฒนาเป็นไข่แก่แล้วและมีเชื้อไวรัสเกาะอยู่ที่ผิวไข่เท่านั้น จะฟักเป็นนอเพลียสที่ติดเชื้อไวรัส SEMBV |
|
|
